生物制药残留DNA提取试剂盒（碘化钠法）
Biopharmaceutical Products Residual DNA Extraction Kit
本产品适用于提取疫苗和治疗用生物制品中所含宿主细胞的残余DNA。本试剂盒根据2020版《中国药典》收录的碘化钠法开发，能够高效地提取样品中的极
微量DNA，且提取后的DNA可通过qPCR等方式进行定量。本产品具有下列特点：
1. 单管操作（无需换管），避免交叉污染。
2. 遵照中国药典收录的碘化钠法。
3. 回收率高于80%，操作时间大约为60-90分钟。
4. 不受宿主DNA来源物种限制。
5. 不需要苯酚和氯仿等有机溶剂。
6. 本产品足够50次，一次可以处理250 μL样本溶液。
7. 本产品只可用于科研。
组成：
成分 规格
2%蛋白酶K溶液 2.5 mL
10×蛋白酶K缓冲液 2.5 mL
碘化钠溶液 25 mL
清洗液A 40 mL
清洗液B 75 mL
10%月桂酰肌氨酸钠溶液 2.5 mL
10 mg/mL糖原溶液 1 mL
自备物品 样本溶液，DNA标准品溶液，TE缓冲液，异丙醇，无核酸酶水。
使用方法 实验前准备:碘化钠溶液使用前需按20:1的比例加入10%月桂酰肌氨酸钠,并加入糖原溶液,使糖原终浓度为35 μg/mL);清洗液B也需加入糖原溶液,使糖原终浓度为35 μg/mL)
1. 取2 mL的离心管三支，按下表加入各成分：
成分 供试管 加标管 阴性对照管
自备的样本溶液 250 μL 250 μL 不加
自备的无核酸酶水 12.5 μL 不加 262.5 μL
自备的DNA标准品溶液 不加 12.5 μL 不加
2%蛋白酶K溶液 50 μL 50 μL 50 μL
10×蛋白酶K缓冲液 50 μL 50 μL 50 μL
混匀，短暂离心确保所有溶液都在管底。
自备的TE缓冲液 137.5 μL 137.5 μL 137.5 μL
总体积 500 μL 500 μL 500 μL
2. 将上述离心管放入56℃酶解30分钟或适宜时间。
3. 加入500 L碘化钠溶液混匀。
4. 短暂离心后，置于40℃水浴中孵育15分钟。
5. 如果预期核酸浓度非常低，可以另购微量核酸彩色沉淀剂在此步加入。本试剂盒不提供此成份。
6. 再加入900 L自备的异丙醇，再次混匀后，室温静置15分钟。
7. 13000×g离心30分钟后弃去上清。
8. 然后将离心管倒置在吸水纸上，使管壁的液体流尽。
9. 各管中分别加人800 μL清洗液A，轻弹离心管底使沉淀从管壁上脱离。
10. 13000×g，离心20分钟弃去上清。
11. 每管加人1500 μL清洗液B，轻弹离心管底使沉淀从管壁上脱离。
12. 13000×g，离心30分钟，弃上清，晾干。
13. 每管加入50 μL 自备的TE缓冲液，轻弹离心管底。
14. 40℃水浴静置5-10分钟以充分溶解DNA。
15. 进行后续的PCR实验操作。