氯膦酸二钠脂质体(ClodronateLiposomes)是用来在实验动物体内(in vivo)或者体外(in vitro)清除(Deplete)单核巨噬细胞的即用型液体试剂。
脂质体(Liposomes)是一种人工膜,由磷脂和胆固醇构成。一般直径在25nm-1μm之间。细胞体外(in vitro)吞噬实验显示,随着脂质体(Liposome)的直径从100nm到1μm,细胞吞噬的脂质体(Liposomes)随之增多,
直至高达2μm;动物体内(in vivo)实验显示,随着直径增大,体内吞噬的脂质体(Liposomes)更多。脂质体(Liposomes)和巨噬细胞(Macrophages)间有最小的间隙,辅以改变脂质体(Liposomes)表面的电荷,尤其
是负电荷,能更好促进巨噬细胞对脂质体的吞噬。采用多室的脂质体结构,让包裹更多的药物,从而到达效应的阈浓度。
氯膦酸二钠(Clodronate),化学名为: 二氯亚甲基二膦酸二钠,在细胞内代谢成不可水解的ATP类似物,通过抑制线粒体中的ADP/ATP转运机制诱导细胞凋亡。
LIPOSOMA优化脂质体的组分,充分利用脂质体和巨噬细胞的属性,改进脂质体包裹氯膦酸二钠的工艺,严格控制产品的封装效率,粒径分布,无菌操作等关键参数,确保产品的批内稳定性和批间重复性。
产品组分
磷脂双层由磷脂酰胆碱和胆固醇组成。所有脂质体制剂均溶解于无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)中(PH7.0-7.5):
- 10mM Na2HPO4
- 10mM NaH2PO4
- 140 mM NaCl
ClodronateLiposomes:氯膦酸盐以CH2Na2Cl2O6P2•5H2O的形式包封在脂质体囊泡中。
产品使用
具体注射量请参考相关文献,并根据自身实验条件(如实验目的,注射方式,注射周期)进行摸索和优化。
腹腔注射
1.注射前,将Clodronate Liposomes和无菌PBS(注射用)从冰箱中取出。自然回温到室温(18 ℃)。
【注】:Clodronate Liposomes悬液禁止冻存,也不能超过30 ℃。
2.上下颠倒8-10次混匀。将26 Gauge针头连接到1ml的注射器上,吸取200 μl的Clodronate Liposomes。
3.用左手抓取小鼠耳后足够多的皮肤和尾巴,固定头部和四肢。
4.将小鼠微微倾斜,让头部朝向地面,使得原本集中在腹部右下方的器官向头部方向移动,远离注射位点。
5.注射前将注射器颠倒6次,将Clodronate Liposomes混匀。
【注】:长时间的放置,会使脂质体在注射器中发生沉淀,导致注射时浓度不均一。
6.针头成30度角插入腹部右下方。分别注射200 μL Clodronate Liposomes(实验组)和PBS(对照组)。