一步法cDNA第一链反转录试剂盒(with dsDNase)

2022-11-19 08:25

cDNA第一链反转录试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系5×Golden RT MasterMix进行RNA的反转录反应,使用时只需加入模板、引物和RNase Free H2O 即可,大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作过程中的人为误差。MasterMix中添加了HL dsDNase(热敏双链特异性核酸酶),该双链特异性核酸酶(又名gDNA Remover)可在反转录的过程中,直接降解去除RNA中残留的基因组DNA污染(可去除100ng基因组DNA),从而在定量PCR的检测中无需考虑基因组污染的干扰,设计的定量PCR引物也无需进行横跨外显子。该试剂盒尤其适用于定量PCR检测。

该预混体系包含点突变致RNase H活性缺失的Golden MLV Reverse Transcriptase反转录酶、dNTP、反应Buffer、gDNA去除试剂和RNase Inhibitor。该试剂盒采用的反转录酶去除了RNase H活性,从而避免反转录过程中降解RNA。同时经过突变文库筛选,使得其热稳定性更强,可耐受55℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应,采用高温反转录可显著打开RNA二级结构,从而提高复杂RNA模板的扩增性能、提高反转录cDNA的长度和产量,从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链cDNA可广泛用于2nd Strand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR反应等。

组分

组分名称数量

5XGolden RT MasterMix (with dsDNase)400 μl

20XOligo dT(25)&Random Primer100 μl

Rnase Free H2O1 ml×2

注:1.该制品可有效反转录mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA。

  2. 该制品不可反转录microRNA、病毒DNA/RNA样品。

主要特征

dsDNase有效去除基因组的污染,抑制了因基因组污染引起的非特异性扩增

55℃进行反转录的MLV反转录酶,能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板

高效便捷的反转录预混体系

反转录引物为Random Primer和Oligo dT Primer预混的RT Primer Mix,可更好的合成样品中的各种cDNA

一步法cdna反转录试剂盒

储存

请置于-20°C,可保存2年;避免反复冻融。注:如5×Golden RT MasterMix(with dsDNase)出现沉淀属正常现象,可用手捂化,混合均匀后使用不影响实验结果。