外泌体(Exosomes)提取试剂盒-乳汁/唾液

2022-07-04 11:11

适用样本

乳汁/唾液


产品特点

1.使用方便,无需超速离心,省时省力;

2.纯度高,富集量大,应用范围广;

3.获取的Exosome结构和功能完整;

4.稳定性好,便于运输,便于保存。


仪器准备

1.离心机

2.移液器

3.冰箱

4.冰盒


试剂准备

PBS缓冲液 HBSS 纯水


耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套


使用方法

1. 收集2ml待提取的乳汁/唾液样品,置2-8℃保存。

2. 将样品在4℃条件下,3000×g离心15分钟。弃沉淀,收集上清。

3. 小心将上清移入另一干净离心管中。

4. 将样品在4℃条件下,10000×g离心20分钟。弃沉淀,收集上清。

5. 小心将上清移入另一干净离心管中。

6. 在2ml乳汁/唾液样品中加入2ml提取液A,盖紧离心管盖,上下颠倒混匀1分钟左右,使液体充分混匀。

7. 在4ml液体样品中加入1ml提取液B,盖紧离心管盖,上下颠倒混匀1分钟左右,使液体充分混匀。

8. 置2-8℃冰箱静置过夜。

9. 在4℃条件下,10000×g离心60分钟。

10. 小心移除上清,收集沉淀。

11. 取50-100ul外泌体保存液将沉淀重悬,即得到外泌体样品。

12. 将外泌体样本-80℃保存或直接用于下游应用。


使用注意事项

1.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂。

2.以下以2ml乳汁/唾液为例,实际操作时按乳汁/唾液样本和提取液用量体积比等比例调整使用即可。

3.不同乳汁/唾液样本外泌体数量差异极大,请根据实际情况选择乳汁/唾液样本的量,根据下游应用和参考文献确定。条件允许的情况下采用尽可能多的乳汁/唾液样本。

4.常规的乳汁/唾液样本最佳上样量为5-10ml及以上,条件允许的情况下采用尽可能多的乳汁/唾液样本。

5.已经分离好的外泌体样本如果需要进行电镜观察,只能冰上或4℃保存,存放时间不超过两天,注意不可冷冻保存,否则可能会影响电镜观察效果。